引言

• 原发性纤毛运动障碍（PCD）是一组临床和遗传异质性的呼吸纤毛疾病
• 无单一金标准诊断测试，当前诊断需结合技术要求高的检查
• 2014 年成立新的 PCD ERS 任务组，旨在制定循证诊断指南

方法

• 任务组组成：多学科临床医生和科学家，ERS 方法学家提供指导
• 患者重要结局：准确诊断对患者健康和生活质量重要
• 主题和问题制定：评估 PCD 诊断的六个方面，使用 PICO 结构化问题
• 文献搜索方法：搜索 Medline 和 Embase 数据库
• 证据质量和推荐强度：使用 GRADE 方法
• 共识声明：使用改良德尔菲调查达成共识

结果

临床特征

• 推荐转诊患者：有多种特定特征、正常体位有可疑症状、患者兄弟姐妹、使用症状组合和预测工具
• 证据回顾：两项研究提供推荐证据，PICADAR 预测工具表现较好
• 叙述性证据回顾：多项研究描述临床特征与 PCD 的关系
• 关键问题和研究需求：需前瞻性队列研究，考虑年龄、地区、遗传等因素

鼻一氧化氮（nNO）

• 推荐意见：>6 岁学龄儿童和成人使用化学发光分析仪和软腭闭合技术测量；<6 岁儿童建议使用潮式呼吸测量；临床病史强的患者即使 nNO 正常也应进一步检查
• 诊断测试解释：PCD 患者 nNO 极低，测量方法和阈值存在差异
• 证据回顾：四项研究直接解决问题，整体证据信心中等
• 叙述性证据回顾：多种测量方法各有特点，儿童测量存在挑战
• 诊断准确性
  • 不同研究的敏感性和特异性
  • 不同采样方法和阈值的影响
• 影响因素
  • 基因突变与nNO水平的关系
• 关键问题与研究需求
  • 缺乏合适的阈值共识
  • 需开发标准化方案和阈值
  • 加强基因型 - 表型相关性研究
• 总结
  • 特定条件下检测准确性高
  • 单独使用不足以确诊或排除PCD
  • 可作为诊断流程的一部分

高速视频显微镜分析（HSVA）

• 推荐意见：用于疑似 PCD 患者诊断；诊断时不能仅评估纤毛摆动频率；ALI 培养后重复 CBF/P 评估以提高准确性
• 证据强度：低
• 推荐意见
  • 作为诊断工作的一部分
  • 评估纤毛摆动模式
  • 培养后重复评估
• 检测说明
  • 分析纤毛功能
  • 记录纤毛摆动模式和频率
  • 减少主观性和观察者偏差
• 诊断准确性
  • 不同研究的敏感性和特异性
• 额外证据
  • 缺乏标准化方法
  • 培养可提高准确性
  • 纤毛摆动频率与PCD的关系
• 关键问题与研究需求
  • 缺乏合适的细胞处理和评估方法
  • 开发标准化方案和阈值
  • 加强基因型 - 超微结构表型相关性研究
• 总结
  • 经验丰富的观察者进行时准确性高
  • 培养可提高准确性
  • 未充分标准化，需经验丰富的人员操作

透射电子显微镜（TEM）

• 推荐意见：用于疑似 PCD 患者诊断；超微结构正常但临床病史强的患者应进一步检查；有典型纤毛超微结构缺陷的患者无需进一步确认检查
• 证据强度：低
• 推荐意见
  • 作为诊断工作的一部分
  • 正常超微结构但临床病史强时进一步检查
  • 典型超微结构缺陷无需进一步检查
• 检测说明
  • 检测纤毛超微结构缺陷
  • 采样和处理方法
  • 正常和异常超微结构表现
• 诊断准确性
  • 不同研究的敏感性和特异性
• 额外证据
  • 常见超微结构缺陷类型
  • 提高诊断准确性的附加技术
  • 不确定结果的原因和处理方法
• 关键问题与研究需求
  • 改进TEM技术
  • 开发标准化方案和术语共识
  • 确认罕见缺陷的相关性和患病率
• 总结
  • 高度特异性，是诊断关键部分
  • 不能单独排除诊断
  • 证据等级低

基因分型

• 情况：无符合纳入标准的研究，无法给出正式推荐，提供专家共识声明
• 问题探讨
  • 基因分型是否可作为诊断工具缺乏研究证据
• 检测说明
  • PCD的遗传异质性
  • 致病基因和突变类型
  • 检测方法和注意事项
• 额外证据
  • 可确定部分病例的遗传病因
  • 特定基因的突变与PCD的关系
  • 基因分型的局限性和注意事项
• 总结
  • 目前缺乏作为诊断工具的证据
  • 未来可能成为独立检测方法
• 准确性：因缺乏合适研究，无法确定基因检测的准确性，部分研究表明约65%的病例可通过基因检测确定致病基因，随着更多基因被发现，这一比例可能增加
• 专家共识：可用于确诊经其他手段诊断的PCD患者或临床高度怀疑但无其他检查手段的患者；可用于HSVA、TEM或IF未能确诊的高度怀疑患者；检测和结果解读应遵循国内外最佳实践指南；基因诊断应与临床及TEM/IF/HSVA表型一致；家系等位基因分离分析很重要；有助于遗传咨询；未来可能用于基因型特异性治疗

免疫荧光

• 情况：无符合纳入标准的研究，无法给出正式推荐，提供专家共识声明
• 作为诊断工具的研究情况：未找到符合纳入标准的研究来回答是否应将免疫荧光作为诊断工具的问题，虽有中心使用其辅助诊断，但缺乏确定其准确性的证据
• 专家共识：能够确认突变的致病性；可检测部分超微结构正常或轻微异常的PCD病例；有助于诊断外、内动力臂、微管紊乱、中央对和连接蛋白缺陷等情况
• 特点：比其他诊断测试更便宜、更容易，适用于资源有限的环境

关键未解决问题与研究需求

• 基因检测在PCD诊断途径中的作用不明确，需研究其准确性和局限性
• 需明确PCD诊断测试的标准
• 需开展验证研究，调查免疫荧光作为PCD诊断工具在诊断队列研究中的准确性和局限性，对应用的每种抗体进行验证

确诊或排除PCD诊断

阳性诊断

• 支持性病史患者：TEM显示PCD典型纤毛超微结构缺陷；PCD致病基因的明确双等位基因突变

高度可能诊断

• 符合PCD病史患者：极低nNO加上HSVA三次提示PCD；极低nNO加上细胞培养后HSVA符合PCD

排除诊断

• 临床怀疑程度不高且nNO正常/高加上HSVA正常；或nNO正常/高加上细胞培养后HSVA正常，可告知患者诊断极不可能，无需进一步检测；临床怀疑程度高时，现有诊断测试不足以排除诊断

诊断算法

步骤1：nNO和HSVA

• 均正常：PCD诊断极不可能，除非临床怀疑特别高，否则无需进一步检测
• nNO低和/或HSVA异常：可能诊断PCD，重复步骤1测试并进入步骤2

步骤2：TEM

• 正常：考虑对与TEM正常或轻微异常相关的基因进行基因检测，并在细胞培养后重复HSVA
• 显示典型缺陷：确诊PCD，考虑基因检测以进一步表征潜在缺陷

步骤3：基因检测和重复HSVA ± 细胞培养

进一步检测

• 诊断高度可能或不确定的患者可考虑免疫荧光或放射性气溶胶黏液纤毛清除分析，但证据有限；随着PCD诊断技术的进步，可召回患者进行进一步检测

讨论

• 指南为PCD诊断提供循证建议，随着新诊断测试和现有测试的改进，需重新审视
• 明确无完美诊断测试，需结合多种测试；定义了不同诊断情况的标准，但当前证据无法100%排除诊断
• 研究受缺乏金标准影响，存在偏倚风险；建议方法学家参与研究设计，制定国际诊断测试标准，改进患者临床表型报告，研究诊断对患者结局和生活质量的影响